PENGARUH CHLOROQUINE TERHADAP INTERLEUKIN-1β, AKTIVASI CASPASE-1 DAN SURVIVAL RATE PADA TIKUS MODEL SEPSIS

Aryo Suseno, Tatar Sumandjar, HM Bambang Purwanto

DOI: https://doi.org/10.23917/biomedika.v9i1.4347

Abstract

Sepsis masih merupakan salah satu penyebab kematian tertinggi di ruang rawat intensif. Mekanisme sepsis belum diketahui secara penuh. Perlunya metode-metode baru dalam penanganan sepsis. Penelitian-penelitian baru menemukan adanya peran dari Nod-like Receptor dan inflammasome. Chloroquine menunjukkan hasil yang cukup menjanjikan. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh qloroquin terhadap interleukin-1β, aktivasi caspase-1 dan survival rate pada tikus model sepsis. Penelitian adalah eksperimen hewan coba (Rattus norvegicus) yang disepsiskan dengan Cecal Ligation and Puncture (CLP). Sampel 52 tikus, dibagi menjadi 2 kelompok; Kelompok 1 untuk IL-1β dan kelompok 2 aktivasi Caspase-1. Tiap kelompok dibagi 3 sub kelompok; kontrol tanpa CLP + placebo (NaCl 0.9% 2ml), perlakuan dengan CLP + placebo, dan kelompok terapi dengan CLP +Chloroquine (CHQ) 50mg/Kg BB personde. Terapi dan placebo diberikan 24, 48 dan 72 Jam setelah CLP. Tikus mati dan moribund dicatat sebagai mortalitas. Pada hari ke 6, tikus yang hidup diambil darahnya dan dikorbankan dengan dislokasi servikal. Kadar IL-1β dengan ELISA pada serum, Aktivasi Caspase-1 dengan Flowcytometry dengan pewarnaan FLICA 660 pada Peripheral Blood Mono-Nuclear Cells (PBMC) dan Whole Blood (WB). Analisis dengan SPSS 22. Beda rerata masing-masing subkelompok dianalisa dengan ANOVA bila distribusi normal dan atau uji Kruskal-Wallis dilanjutkan dengan Mann–Whitney.Hasil penelitian menunjukkan tidak adanya perbedaan survival rate yang bermakna antar sub-kelompok dan antar kelompok (mean 52 vs 62, CI: (-37.32) - 27.98, P=0.767). Didapatkan rerata kadar IL-1β yang lebih rendah pada kelompok terapi dibanding kelompok perlakuan (mean 0.08975 vs 0.09680 CI: (-0.024) – 0.0097, P=0,376), namun tidak bermakna secara statistik. Rerata tingkat aktivasi Caspase-1 pada PBMC (mean 9,46 vs 15.04 CI: (-6.72) – 24.82 , P=0.865) dan WB (mean 2,99 vs 10,99 CI: (-5.303) – 5.844, P=0.478) lebih rendah pada kelompok terapi dibanding perlakuan walaupun tidak bermakna secara statistik. Penelitian ini menunjukkan bahwa penghambatan kadar inflamasi tidak berhubungan langsung dengan survival rate. Mekanisme anti-inflamasi Chloroquine, salah satunya, tampak melewati jalur inflammasome.

 

Kata kunci: Sepsis, Chloroquine, Inflammasome, Caspase-1, IL-1β, Survival rate.

Full Text:

PDF

References

Bianchi ME. 2007, DAMPs, PAMPs and alarmins: all we need to know about danger. J. Leukoc. Biol. 81:1–5.

Bouernfeind F, Hornung V.2013, Of inflammasomes and pathogens-sensin of microbes by the inflammasome, EMBO Mol Med., 5(6):814–826

Dellinger RP, Levy MM, Rhodes A, Annane D, Gerlach H, Opal SM, et al.2013, Surviving Sepsis Campaign Guidelines Committee including the Pediatric Subgroup. Surviving sepsis campaign: international guidelines for management of severe sepsis and septic shock: 2012. Crit Care Med., 41:580- 637.

ENV/JM/MONO,2000, joint meeting of the chemicals committee and the working party on chemicals, pesticides and biotechnology. guidance document on the recognition, assessment, and use of clinical signs as humane endpoints for experimental animals used in safety evaluation. https://ntp.niehs.nih.gov/iccvam/suppdocs/feddocs/oecd/oecd_gd19.pdf.

Fink SL & Cookson BT. 2005, Apoptosis, Pyroptosis, and Necrosis: Mechanistic Description of Dead and Dying Eukaryotic Cells. Infection and immunity. 73 (4):1907–1916.

Hermawan AG. 2008, SIRS, Sepsis dan syok septik. 1st edition. Surakarta: UNS press. Surakarta.

Hermawan AG. 2011 Steroid dosis rendah pada penatalaksanaan sepsis. 1st edition. Surakarta: UNS press. Surakarta.

Kawai T & Akira S. 2010, The role of pattern-recognition receptors in innate immunity: update on Tolllike receptors. Nat Immunol. 11:373-84.

Kawai T, Akira S. 2011, Toll-like Receptors and Their Crosstalk with Other Innate Receptors in Infection and Immunity. Immunity. 34: 637-650.

Lamkanfi M, Sarkar A, Walle LV, Vitari AC, Amer AO, Wewers MD, et al. 2010, Inflammasome-Dependent Release of the Alarmin HMGB1 in Endotoxemia. The J of Immun, 185: 4385–4392.

Menezes GB, Amaral SS, Alvarenga DM, Cara DC. 2008, Surgical procedures to an experimental polymicrobial sepsis: Cecal Ligation and Puncture. Braz J Vet Pathol, 1(2): 77 – 80

Opal SM, Garber GE, LaRosa SP, et al. 2003, Systemic host responses in severe sepsis analyzed by causative microorganism and treatment effects of drotrecogin alfa (activated). Clin Infect Dis. 37:50–58.

Shin MS, Kang Y, Lee N, Wahl ER, Kim SH,Kang KS, Lazova R, Kang I.2013, Self dsDNA induces IL-1β production from human monocytes by activating NLRP3 inflammasome in the presence of anti-dsDNA antibodies. J Immunol. 15; 190(4): 1407–141.

Shin MS, Kang Y, Lee N, Kim SH, Kang KS, Lazova R, Kang I. 2012, U1-snRNP activates the NLRP3 inflammasome in human Monocytes. J Immunol. 15; 188(10): 4769–4775.

Takahashi W, Watanabe E, Fujimura L, Watanabe-Takano H, Yoshidome H4, Swanson PE, et al. 2013. Kinetics and protective role of autophagy in a mouse cecal ligation and punctureinduced sepsis. Critical Care, 17:R160.

Toscano MG, Ganea D, Gamero AM. 2011, Cecal Ligation Puncture Procedure. J Vis Exp. 7(51): 2860.

Van der Poll T & Opal SM. 2008, Host-pathogen interactions in sepsis. Lancet Infect Dis. 8:32-43.

Wen H, Miao EA, Ting JPY. 2013, Mechanisms of NOD-like Receptor-Associated Inflammasome Activation. Immunit, 39: 432-441.

Yang M, Cao L, Xie M, Yu Y, Kang R, Yang L, et al. 2013, Chloroquine Inhibits HMGB1 Inflammatory Signaling and Protects Mice from Lethal Sepsis. Biochem Pharmacol. 86(3): 410–418.

Yasuda H, Leelahavanichkul A, Tsunoda S, Dear JW, Takahashi Y, Ito S, Hu X, Zhou H, Doi K, Childs R, Klinman DM, Yuen PST, Star RA. 2008, Chloroquine and inhibition of Tolllike receptor 9 protect from sepsis-induced acute kidney injury. Am J Physiol Renal Physiol. 294(5): F1050–F1058.

Zainuddin M. 1999, Metodologi Penelitian. Lembaga Penelitian Universitas Airlangga, Surabaya.

Article Level Metrics

Refbacks

  • There are currently no refbacks.